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ELISA直接法、間接法、競爭法和夾心優(yōu)缺點對比
更新時間:2025-09-22瀏覽:154次

  ELISA直接法、間接法、競爭法和夾心優(yōu)缺點對比

  以下是ELISA四種主要方法(直接法、間接法、競爭法、夾心法)的優(yōu)缺點對比,本生綜合了高可信度來源的分析:

  一、直接法

  原理?:抗原直接包被于固相載體,酶標一抗直接結合抗原并顯色?。

  優(yōu)點?:

  操作步驟少,檢測速度快(無需二抗)?。

  避免交叉反應(無二抗干擾)?。

  缺點?:

  靈敏度低(信號無放大)?。

  背景高(非特異性吸附雜質蛋白)?。

  需為每種靶標定制酶標一抗,成本高?。

  二、間接法

  原理?:抗原包被后,先加一抗,再用酶標二抗檢測一抗?。

  優(yōu)點?:

  靈敏度高(二抗信號放大)?。

  經濟靈活(一種酶標二抗可檢測多種一抗)?。

  缺點?:

  步驟多(需二抗孵育)?。

  可能交叉反應(二抗非特異性結合)?。

  三、競爭法

  原理?:待測抗原與酶標抗原競爭結合有限抗體,顯色信號與待測抗原量成反比?。

  優(yōu)點?:

  適用于小分子或低純度樣本?。

  數據重現性好?。

  缺點?:

  靈敏度與特異性較低?。

  需精確控制競爭條件?。

  四、夾心法

  原理?:雙抗體夾心抗原(捕獲抗體+檢測抗體)?。

  優(yōu)點?:

  高靈敏度與特異性(雙抗體識別不同表位)?。

  無需純化抗原?。

  缺點?:

  需抗原具兩個以上抗體結合位點?。


圖片.png


  注:夾心法需注意抗體配對驗證,競爭法需優(yōu)化標準曲線范圍?。

  注:僅供科研使用,以上資料供參考,如需具體產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。

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