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　　以下是ELISA試劑盒實驗中常見問題及解決方案的總結(jié)，天津本生技術小編結(jié)合實驗操作關鍵環(huán)節(jié)進行分類說明：

　　一、?樣本處理問題?

　　溶血/脂血干擾?

　　現(xiàn)象?：背景值升高或結(jié)果異常。

　　解決?：血液樣本需靜置1-2小時后離心(3000×g，15分鐘)，避免劇烈震蕩;脂血樣本建議超速離心或過濾。

　　反復凍融影響?

　　現(xiàn)象?：靶蛋白降解導致信號減弱。

　　解決?：樣本分裝保存(-20℃或-70℃)，凍融≤3次。

　　二、?加樣與孵育問題?

　　加樣誤差?

　　現(xiàn)象?：復孔差異大(CV>15%)。

　　解決?：使用校準后的移液器，垂直加樣避免氣泡;高濃度樣本優(yōu)先稀釋。

　　孵育不充分?

　　現(xiàn)象?：信號弱或無信號。

　　解決?：確保37℃孵育時間準確(誤差±5分鐘)，微孔板加蓋防蒸發(fā)。

　　三、?洗滌問題?

　　洗板不凈?

　　現(xiàn)象?：高背景或非特異性結(jié)合。

　　解決?：手工洗板需注滿每孔，靜置1分鐘后甩干;自動洗板機需定期維護噴頭。

　　洗滌液殘留?

　　現(xiàn)象?：孔底液體影響OD值。

　　解決?：甩板后倒扣于吸水紙上輕拍。

　　四、?顯色與檢測問題?

　　顯色異常?

　　現(xiàn)象?：顯色過快(底物污染)或過慢(酶失活)。

　　解決?：TMB避光保存，現(xiàn)配現(xiàn)用;終止后10分鐘內(nèi)讀數(shù)。

　　標準曲線不佳?

　　現(xiàn)象?：R2<0.95或線性差。

　　解決?：標準品復溶后渦旋混勻，避免凍干粉殘留;建議雙對數(shù)擬合曲線。

　　五、?其他高頻問題?

　　“白板"現(xiàn)象?

　　原因?：酶標抗體失效或漏加。

　　解決?：檢查試劑有效期，按順序添加酶標抗體。

　　邊緣效應?

　　原因?：溫育溫度不均。

　　解決?：孵育時避免疊放板條，確保熱空氣流通。

　　六、?預防性措施?

　　試劑管理?：未使用板條需密封保存(含干燥劑)，避免受潮。

　　質(zhì)控設置?：每板需包含陰/陽性對照和空白孔。

　　設備校準?：定期校驗酶標儀波長(如450nm±2nm)和移液器精度。

　　注：若問題持續(xù)，建議聯(lián)系試劑盒廠家提供標準操作視頻或技術支持。

　　注：以上資料僅供參考，具體詳情來咨詢技術 老師或品牌供應商。

　　本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承：遵紀守法，嚴于律己，寬仁以待，敢于承擔的企業(yè)精神作為標準，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。天津本生 Elisa試劑盒